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仪器之家 2020-12-01 13:58 吕芬

利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度差异,分离两者。使用1M氯化纳提取抽提,使DNA粘液获得,加入含有少量辛醇的氯仿,振荡,使乳化,再离心将蛋白质除去,此时,蛋白质在水相及氯仿相中间停留,而DNA在上层水相中。DNA钠盐通过用2倍体积95%乙醇沉淀出来,或可以使用0.15MNaCL液将洗涤细胞反复洗涤,将RNA去除,再通过氯仿-异醇法将蛋白去除。比较这两种方法,第二种方法可能会降解更少的核酸。利用稀盐酸溶液对DNA进行提取的时候,将如SDS适量去污剂加入,对于蛋白质与DNA的分离很有帮助。在提取过程中,为了对组织中的DNase对DNA的降解作用有所抑制,在氯化钠溶液中,将柠檬酸钠加入作为金属离子的烙合剂,一般使用0.015M柠檬钠和15MNaCL,即为SSC溶液,用作DNA的提取。

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