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仪器之家 2020-10-26 09:05 蒲元明

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中国科学展在PCR扩增时,在将一对引物加入的同时再将一个特异性的荧光探针加入,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,淬灭基团吸取报告基团发射的荧光信号。PCR扩增时,aq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,分离了报告荧光基团和淬灭荧光基团,所以,荧光信号可以被荧光监测系统接收到,就是每有一条DNA链扩增,就会形成一个荧光分子,从而使得荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步实现。为了分析计数方便,需要获得的菌落图像清晰有效,成像硬件的作用就在于此。拍照成像和扫描成像是如今的两种成像硬件,摄像头拍照成像具有成像速度快,确保在0.5秒内获得菌落图像的优点。单反相机、卡片机拍照成像具有能够自动对焦并且获得更高的分辨率的优点,然而,成像时间却需要3-4秒。成像环境中的光线强度是拍照成像的致命弱点,不管背光还是暗视野,做到图像中心与边缘保持完全一致,相对来说比较困难。从而导致平皿上亮度的不一致。针对环境光干扰成像方面,通过对仪器照明系统进行精密的设计,上下光源采用了宽光带的LED柔光系统,并结合“悬浮式暗视野”成像系统,不但可以使玻璃培养皿的折射光斑得到消除,而且菌落表面的皱折、凹陷、边缘的锯齿由于光比的改变更富立体感。扫描成像不同于在灯箱中营造均匀面光源,其是面光源的由线光源移动而形成,拥有相对比较均匀的光线强度,其均匀度一般比拍照灯箱的面光源要高一个数量级,菌落目标的亮度不匀问题从成像硬件上得到了解决,然而扫描只是平面的效果,培养基表层和深层的细微菌落得不到展现,并且菌落颜色等多方面的情况得不到展现,观察分析具有一定的困难。随着科技发展,涌现出了高清晰的CMOS、CCD以及高清晰的镜头,菌落色彩具有很高的还原性、清晰度,使得某些复杂菌落计数问题得到了解决。对于这类的产品越来越被科研单位、检测部门、大专院校等所喜爱。

用不同颜色的荧光素来标记不同类别的单克隆抗体,能够在一个细胞中同时分析多个抗原分子,然而不是所有荧光抗体都能够自由的组合的,在确定组合之前,还需要注意下列因素。454焦磷酸法平台

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